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抑菌圈检测是利用待测抗菌物质在琼脂平板上的扩散作用,使其周围的细菌生长受到抑制,从而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小通常被用来判定待测物质的抑菌效价,即其抑制细菌生长的能力。
抑菌圈检测方法解析
抑菌圈检测方法步骤
(1)准备材料及用具
培养皿、无菌吸管或针筒、圆片滤纸、带玻璃珠的无菌水、带过滤漏斗的三角板、镊子、接种针(环)、熔化状态的琼脂培养基、一定浓度的药剂以及要测试的菌种。
还可以准备打孔器、牛津杯、不锈钢圆管等器皿及用品。
(2)制备菌悬液
从纯培养物或临床样本中获取细菌,并使用适当的培养基培养至对数生长期。
用无菌生理盐水或其他稀释液将细菌制备成一定浓度的菌悬液,通常为0.5麦氏比浊单位(相当于1x10^8CFU/mL)。
(3)接种平板
将菌悬液均匀涂布在含有固态培养基的平板上,如Mueller-Hinton琼脂,确保平板表面覆盖且细菌分布均匀。
也可以采用倾注平板法或预加菌液倾注平板法制备试验平板。
(4)放置抑菌剂
如果是使用扩散法(如牛津杯法),在平板上放置含有固定浓度抑菌剂的纸片或圆片滤纸(事先在不同浓度的抑菌剂中浸渍片刻)。
如果是使用其他方法,如微量稀释法或宏量稀释法,则在平板上或试管中加入不同浓度的抑菌剂溶液。
(5)培养
将接种好的平板放入恒温培养箱中,在推荐的温度下(通常为35-37°C)培养一定时间(通常为16-24小时)。
(6)读取结果
培养结束后,观察抑菌剂纸片或圆片滤纸周围的抑菌圈大小。
使用尺子测量抑菌圈直径,以确定细菌对抑菌剂的敏感性。
(7)数据处理
对照样品应无抑菌圈产生,否则抑菌圈试验无效。
抑菌圈数值可以取多个样品的平均值,并保留有效数字。
抑菌圈结果判定标准
抑菌圈结果判定标准主要依据抑菌圈直径的大小来判断细菌的敏感性或抑菌物质的抑菌效果。
具体而言,抑菌圈直径的大小反映了抑菌剂或药物对微生物的抑制作用强弱。一般情况下,抑菌圈直径判断标准值的具体区间为15-30mm1.
不同的抑菌物质其抑菌效果有所差异,直径较大通常意味着该物质对细菌的抑制作用较强,能在较大范围内阻止细菌的生长繁殖;而直径较小则表示抑制效果相对较弱,可能需要更高浓度或更有效的物质才能达到理想的抑菌效果。
抑菌圈检测方法解析