陶瓷表面抗菌性能抑菌环法检测技术指南  

一、检测原理与适用范围  

1.抑菌环法原理  

陶瓷表面抗菌成分（如纳米银、氧化锌）通过扩散作用进入琼脂培养基，抑制周围细菌生长，形成透明抑菌圈。抑菌环直径大小与抗菌剂浓度、扩散速率正相关，可定性/半定量评价抗菌活性。  

2.适用场景  

扩散性抗菌陶瓷：含溶出型抗菌剂（如Ag⁺、Zn²⁺）的釉面砖、卫生陶瓷  

不适用场景：非扩散性抗菌材料（如光催化TiO₂涂层，需采用贴膜法）  

二、核心检测标准  

标准名称适用对象测试菌种判定指标  

GB/T23763-2009光催化抗菌陶瓷大肠杆菌、金黄色葡萄球jun抑菌环直径＞7mm为有效  

QB/T2591-2003抗菌塑料（参考适用于陶瓷）大肠杆菌、金黄色葡萄球jun抑菌环直径及清晰度  

ASTME2149-20抗菌材料（国际标准）大肠杆菌、肺炎克雷伯菌抑菌环直径≥6mm  

三、检测材料与仪器  

1.样品准备  

陶瓷样品：50mm×50mm×5mm，表面平整无裂纹，经紫外灭菌30min（波长254nm，距离30cm）  

对照样品：未添加抗菌剂的同种陶瓷（阴性对照）、含1%氯己定的标准抗菌片（阳性对照，直径6mm）  

2.培养基与菌种  

培养基：MH琼脂（pH7.2±0.2，厚度4mm±0.5mm）  

测试菌种：  

大肠杆菌（ATCC25922）  

金黄色葡萄球jun（ATCC6538）  

菌液浓度：10⁶CFU/mL（麦氏比浊管0.5号，OD₆₀₀=0.08-0.1）  

3.仪器设备  

超净工作台（生物安全二级）  

恒温培养箱（37℃±1℃）  

菌落计数器  

游标卡尺（精度0.01mm）  

灭菌镊子、培养皿（直径90mm）  

四、操作步骤  

1.菌液制备  

从-80℃甘油管取菌种，划线接种于营养琼脂平板，37℃培养18-24h  

挑取单菌落接种至5mLMH肉汤，37℃、200rpm振荡培养6h（对数生长期）  

用0.9%无菌生理盐水稀释至10⁶CFU/mL（10⁻⁴稀释，OD₆₀₀=0.1）  

2.平板接种与样品放置  

取0.1mL菌液均匀涂布于MH琼脂平板（涂布棒火焰灭菌冷却后使用）  

待菌液吸收（约15min）后，用灭菌镊子将陶瓷样品贴于平板中央  

阳性对照（抗菌片）和阴性对照（空白陶瓷）同步放置，每组3个平行  

3.培养与测量  

平板倒置放入37℃培养箱，培养24h±1h  

取出后测量抑菌环直径（精确至0.1mm），记录是否有卫星菌落（边缘微小菌落）  

五、结果判定与质量控制  

1.判定标准  

抑菌环直径（mm）抗菌活性等级结果判定  

＞15优强抗菌活性  

7-15良中等抗菌活性  

＜7差无抗菌活性  

2.质量控制要求  

阴性对照：无抑菌环（直径=0mm）  

阳性对照：抑菌环直径≥20mm（氯己定抗菌片）  

平行样偏差：3个平行样品抑菌环直径RSD≤10%  

培养基质量：无菌检查阴性，促生长试验合格  

六、典型案例与注意事项  

案例：纳米银陶瓷抑菌环测试  

样品：含2%纳米银的釉面砖  

测试结果：  

菌种抑菌环直径（mm）抗菌等级  

大肠杆菌（ATCC25922）16.2±0.5优  

金黄色葡萄球jun（ATCC6538）13.5±0.3良  

结论：样品对革兰氏阴性菌抗菌活性更强  

注意事项  

样品与培养基接触：确保无气泡，可用无菌玻璃棒轻压样品边缘  

扩散性差异：ZnO类抗菌剂扩散慢，可延长培养至48h  

边缘效应：平板边缘10mm内抑菌环不纳入统计  

菌液浓度：过高导致抑菌环缩小，需严格校准至10⁶CFU/mL  

七、报告与应用  

1.报告核心内容  

样品信息：材质、抗菌剂类型、尺寸  

测试条件：菌种、培养时间、温度  

结果数据：抑菌环直径（平均值±标准差）、照片（含标尺）  

结论：是否符合GB/T23763-2009要求  

2.应用场景  

陶瓷卫浴产品抗菌性能筛选  

抗菌釉料配方优化（如纳米银添加量梯度测试）  

产品质量控制（出厂检验）  

八、中科检测技术优势  

资质认证：CNAS认可抑菌环法检测项目（证书编号L12345）  

经验积累：年均完成500+陶瓷抗菌检测，涵盖卫浴、瓷砖等品类  

方法开发：可定制非标准抑菌环测试（如厌氧菌、真菌抗菌评估）  

九、参考文献  

[1]GB/T23763-2009光催化抗菌材料及制品抗菌性能评价  

[2]QB/T2591-2003抗菌塑料抗菌性能试验方法和抗菌效果  

[3]ASTME2149-20StandardTestMethodforDeterminingAntimicrobialActivityofImmobilizedAntimicrobialAgentsUnderDynamicContactConditions  

编制单位：中科检测技术服务有限公司  

发布日期：2025年9月