医疗器械生产过程中对具病毒去除/灭活效果的工艺步骤进行验证，确定生产工艺去除/灭活病毒的能力、去除/灭活降低系数计算、灭活动力学验证。
 

　　病毒清除验证服务对象
 

　　动物源性医疗器械，根据《动物源性医疗器械注册技术审查指导原则》(2017年修订版)，申请动物源性医疗器械的注册申报，所提交的研究资料中需包含对生产过程中灭活和去除病毒和/或传染性因子工艺过程的描述及有效性验证数据或相关资料。
 

　　病毒清除验证灭活能力验证
 

　　1)选择指示病毒：选择1-2种具代表性的DNA/RNA病毒，如腺病毒、肠道病毒等。
 

　　2)制备病毒悬浮液：调整病毒悬浮液浓度为107-108 TCID50/ml。
 

　　3)接种指示病毒：取医疗器械样本，接种100μl病毒悬浮液，室温条件下吸附30 min。
 

　　4)工艺处理：进行病毒灭活/去除工艺处理，包括实验组和病毒接种的空白对照组。
 

　　5)病毒含量测试：使用细胞培养法、PCR法检测处理前后样本中病毒含量。
 

　　6)加速老化：37 ℃条件下加速老化处理样本，样本期末进行病毒含量复测。
 

　　7)重复验证：调整工艺参数，重复验证测试，最终确定优化方案。
 

　　8)统计学分析：使用t检验等方法分析比较不同组别之间结果。
 

　　病毒清除验证灭活动力学验证
 

　　1)选择指示病毒,调制不同病毒载量的原液(例如107、106、105 TCID50/ml)。
 

　　2)设置多个时间梯度点(例如5min、10min、15min...)，在每个时间点取样。
 

　　3)在上述不同病毒载量和不同时间梯度取样点，依次进行病毒灭活处理。
 

　　4)利用细胞培养法定量检测每个样本病毒的残余含量。
 

　　5)将各时间点的病毒残余量绘制曲线，反映不同处理时间下的病毒减少趋势。如果曲线呈指数下降，则表明该灭活方法符合一阶灭活动力学规律。
 

　　6)通过曲线计算D值，即减少90%病毒需的处理时间。D值可用于评估灭活效率。
 

　　7)最后，确定Z值，即满足安全清除病毒的最大处理时间或次数。
 

　　病毒清除验证参考文件
 

　　YY/T 0771.3-2009/ISO 22442-3:2007 动物源医疗器械 第3部分：病毒和传播性海绵状脑病(TSE)因子去除与灭活的确认
 

　　YY 0970-2023 医疗保健产品灭菌 一次性使用动物源性医疗器械的液体化学灭菌剂  医疗器械灭菌过程的特征、开发、确认和常规控制的要求
 

　　《血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指导原则》(国药监注〔2002〕160号)
 

　　《动物源性医疗器械注册技术审查指导原则》(2017年修订版)